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菌落計(jì)數(shù)分析儀操作時(shí)要充分了解微生物實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)情況
更新時(shí)間：2019-01-24 文章更新于2019-01-24 點(diǎn)擊次數(shù)：1762次
一般菌落是指細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖而形成的能被肉眼識(shí)別的生長(zhǎng)物，它是由數(shù)以萬(wàn)計(jì)相同的微生物集合而成。在微生物領(lǐng)域，研究人員會(huì)將細(xì)菌、真菌等微生物進(jìn)行培養(yǎng)后計(jì)算其數(shù)量和觀察其形態(tài)變化。人工計(jì)數(shù)具有耗時(shí)長(zhǎng)、不準(zhǔn)確、操作繁瑣等缺點(diǎn)。而菌落計(jì)數(shù)分析儀廣泛應(yīng)用于食品和飲料的品質(zhì)和衛(wèi)生檢驗(yàn)、水質(zhì)分析、乳及乳制品的檢測(cè)、醫(yī)院臨床檢驗(yàn)、化妝品檢驗(yàn)和藥品的品質(zhì)和質(zhì)量檢測(cè)等。適用于對(duì)微生物的菌落計(jì)數(shù)和菌落生長(zhǎng)情況的觀察等。在實(shí)際進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)分析儀操作時(shí)要充分了解所在的微生物實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)情況。
1.微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)有無(wú)菌操作間和緩沖間，無(wú)菌操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí)，室內(nèi)溫度保持在20～24℃，濕度保持在45～60%，超凈臺(tái)潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)。
2.微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持清潔，嚴(yán)禁堆放雜物，以防污染。
3.嚴(yán)防一切滅菌器材和培養(yǎng)基污染，已污染者應(yīng)停止使用。
4.微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)備有工作濃度的消毒液(75％的酒精)。
5.微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證微生物實(shí)驗(yàn)室的潔凈度符合要求。
6.需要帶入微生物實(shí)驗(yàn)室使用的儀器，器械，平皿等一切物品，均應(yīng)包扎嚴(yán)密，并應(yīng)經(jīng)過適宜的方法滅菌。
7.工作人員進(jìn)入微生物實(shí)驗(yàn)室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換工作服，鞋，帽子，口罩和手套(用75%的乙醇再次擦拭雙手)，方可進(jìn)入微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作。
8.微生物實(shí)驗(yàn)室使用前必須打開微生物實(shí)驗(yàn)室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上，并且同時(shí)打開超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢，應(yīng)及時(shí)清理微生物實(shí)驗(yàn)室，再用紫外燈輻照滅菌30分鐘。
9.供試品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不得開啟，以防污染。檢查前，用75%的酒精棉球消毒外表面。
10.每次操作過程中，均應(yīng)做空白對(duì)照，以檢查無(wú)菌操作的可靠性。
11.吸取菌液時(shí)，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。
12.接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物。
13.帶有菌液的吸管，試管，培養(yǎng)皿于高壓蒸汽滅菌鍋121℃保持20min后取出清洗。
14.如有菌液灑在桌上或地上，應(yīng)立即用75%酒精溶液覆在被污染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時(shí)，應(yīng)立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。
15.凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)消毒后，才能在水下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。
16.微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)。在超凈工作臺(tái)開啟的狀態(tài)下，取內(nèi)徑90mm的無(wú)菌培養(yǎng)皿若干，無(wú)菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15mL，放至凝固后，倒置于30～35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)，證明無(wú)菌后，取平板3～5個(gè)，分別放置工作位置的左中右等處，開蓋暴露30分鐘后，倒置于30～35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)，取出檢查。100級(jí)潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個(gè)菌落，10000級(jí)潔凈室平均不得超過3個(gè)菌落。如超過限度，應(yīng)對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行*消毒，直至重復(fù)檢查合乎要求為止。
1.微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)有無(wú)菌操作間和緩沖間，無(wú)菌操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí)，室內(nèi)溫度保持在20～24℃，濕度保持在45～60%，超凈臺(tái)潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)。
2.微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持清潔，嚴(yán)禁堆放雜物，以防污染。
3.嚴(yán)防一切滅菌器材和培養(yǎng)基污染，已污染者應(yīng)停止使用。
4.微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)備有工作濃度的消毒液(75％的酒精)。
5.微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證微生物實(shí)驗(yàn)室的潔凈度符合要求。
6.需要帶入微生物實(shí)驗(yàn)室使用的儀器，器械，平皿等一切物品，均應(yīng)包扎嚴(yán)密，并應(yīng)經(jīng)過適宜的方法滅菌。
7.工作人員進(jìn)入微生物實(shí)驗(yàn)室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換工作服，鞋，帽子，口罩和手套(用75%的乙醇再次擦拭雙手)，方可進(jìn)入微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作。
8.微生物實(shí)驗(yàn)室使用前必須打開微生物實(shí)驗(yàn)室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上，并且同時(shí)打開超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢，應(yīng)及時(shí)清理微生物實(shí)驗(yàn)室，再用紫外燈輻照滅菌30分鐘。
9.供試品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不得開啟，以防污染。檢查前，用75%的酒精棉球消毒外表面。
10.每次操作過程中，均應(yīng)做空白對(duì)照，以檢查無(wú)菌操作的可靠性。
11.吸取菌液時(shí)，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。
12.接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物。
13.帶有菌液的吸管，試管，培養(yǎng)皿于高壓蒸汽滅菌鍋121℃保持20min后取出清洗。
14.如有菌液灑在桌上或地上，應(yīng)立即用75%酒精溶液覆在被污染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時(shí)，應(yīng)立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。
15.凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)消毒后，才能在水下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。
16.微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)。在超凈工作臺(tái)開啟的狀態(tài)下，取內(nèi)徑90mm的無(wú)菌培養(yǎng)皿若干，無(wú)菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15mL，放至凝固后，倒置于30～35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)，證明無(wú)菌后，取平板3～5個(gè)，分別放置工作位置的左中右等處，開蓋暴露30分鐘后，倒置于30～35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)，取出檢查。100級(jí)潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個(gè)菌落，10000級(jí)潔凈室平均不得超過3個(gè)菌落。如超過限度，應(yīng)對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行*消毒，直至重復(fù)檢查合乎要求為止。
