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技術(shù)支持

平板菌落計(jì)數(shù)法對于活菌檢測存在的重要意義
更新時間:2024-03-27 文章更新于2024-03-27  點(diǎn)擊次數(shù):4137次
  平板菌落計(jì)數(shù)法被廣泛應(yīng)用于生物制品檢驗(yàn)、食品以及飲料和水等的含菌指數(shù)或污染程度的檢測。這種方法主要是將待測樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋之后,其中的微生物充分分散成單個細(xì)胞,取一定量的稀釋樣液接種到平板上,經(jīng)過培養(yǎng),由每個單細(xì)胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落,即一個單菌落應(yīng)代表原樣品中的一個單細(xì)胞。這種方法的優(yōu)勢在于可以獲得活菌的信息。
 
  常用的有平板菌落計(jì)數(shù)法,是根據(jù)每個活的細(xì)菌能長出一個菌落的原理設(shè)計(jì)的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然后將定量的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng),根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù),可算出培養(yǎng)物中的活菌數(shù)。此法靈敏度高,是一種檢測污染活菌數(shù)的方法,也是目前上許多國家所采用的方法。使用該法應(yīng)注意:①一般選取菌落數(shù)在30~300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),過多或過少均不準(zhǔn)確;②為了防止菌落蔓延,影響計(jì)數(shù),可在培養(yǎng)基中加入O.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC);③本法限用于形成菌落的微生物。
 

 

  一般選擇每個平板上長有30—300個菌落的稀釋度計(jì)算每毫升的含菌量較為合適。同一稀釋度的三個重復(fù)對照的菌落數(shù)不應(yīng)相差很大,否則表示試驗(yàn)不。實(shí)際工作中同一稀釋度重復(fù)對照平板不能少于三個,這樣便于數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),減少誤差。由10-4、10-5、10-6三個稀釋度計(jì)算出的每毫升菌液中菌落形成單位數(shù)也不應(yīng)相差太大。
 
  平板菌落計(jì)數(shù)法,所選擇倒平板的稀釋度是很重要的。一般以三個連續(xù)稀釋度中的第二個稀釋度倒平板培養(yǎng)后所出現(xiàn)的平均菌落數(shù)在50個左右為好,否則要適當(dāng)增加或減少稀釋度加以調(diào)整。

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